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當(dāng)前位置：首頁(yè)技術(shù)文章生物3D打泳C合措施。〖?xì)胞膠囊遞送策略實(shí)現(xiàn)軟骨缺損修復(fù)

生物3D打印設計標準！細(xì)胞膠囊遞送策略實(shí)現(xiàn)軟骨缺損修復(fù)

更新時(shí)間：2025-09-12點(diǎn)擊次數(shù)：485

組織工程學(xué)與3D打印生物墨水的發(fā)展為組織再生提供新思路開展。但當(dāng)前生物墨水存在功能單一、適配性不足等問(wèn)題發揮重要帶動作用，難以滿足病理微環(huán)境下缺損修復(fù)的難題意向。開發(fā)藥物遞送生物墨水或許可以針對(duì)不同病理微環(huán)境進(jìn)行治療，但藥物與遞送材料進(jìn)行物理共混會(huì)導(dǎo)致藥物突釋和細(xì)胞刺激文化價值，而化學(xué)接枝可能會(huì)破壞藥物的官能團(tuán)形式，降低其藥理活性；自組裝的納米顆粒和微球往往面臨體內(nèi)難以降解的風(fēng)險(xiǎn)不斷完善。


為了解決這一問(wèn)題進一步提升，湖南大學(xué)劉海蓉、周征團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種細(xì)胞膠囊遞送策略營造一處，以關(guān)節(jié)軟骨損傷作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ透母飫撔?，氧化?yīng)激環(huán)境作為病理模型，開發(fā)載安石榴苷細(xì)胞膠囊多功能生物墨水取得顯著成效。該生物墨水具有加速軟骨再生新模式、抗氧化、抑菌等功能不容忽視，在組織工程與臨床應(yīng)用領(lǐng)域具有巨大應(yīng)用潛力組織了。該研究以題為“Cellular Capsule Delivery Bioink with Punicalagin-Loaded Chondrocyte Membrane Vesicles for Tissue Engineering Therapy"的論文發(fā)表在國(guó)際期刊《Advanced Functional Materials》上，碩士研究生于夢(mèng)依為第一作者說服力。


關(guān)節(jié)中受損軟骨的修復(fù)是臨床治療面臨的一大挑戰(zhàn)搶抓機遇，因?yàn)椴±頎顩r會(huì)阻礙由炎癥因子和活性氧（ROS）引起的軟骨再生。為了解決這一難題表示，作者開發(fā)了一種細(xì)胞膠囊遞送生物墨水全面闡釋。通過(guò)丙烯酸酯-聚（乙二醇）-琥珀酰亞胺酯（AC-PEG-NHS）修飾軟骨細(xì)胞膜囊泡（CMVs），并在其內(nèi)部負(fù)載多個(gè)反應(yīng)性羥基的安石榴苷競爭力所在，制備成細(xì)胞膠囊引人註目。這些膠囊與甲基丙烯酰化絲膠（SerMA）結(jié)合溝通機製，形成光固化生物墨水前體好宣講，該前體不僅表現(xiàn)出優(yōu)異的抗氧化性能，還具有顯著的抗菌活性和強(qiáng)大的軟骨保護(hù)效果顯示。研究使用摩方精密面投影微立體光刻（PμSL）技術(shù)打印的所有結(jié)構(gòu)都保持了高形狀保真度雙向互動，并維持了良好的細(xì)胞活力和活性。

圖1. 細(xì)胞膠囊遞送生物墨水制備與應(yīng)用的示意圖設計能力。

負(fù)染色TEM 圖像顯示囊泡表現(xiàn)出特征性的雙層杯狀結(jié)構(gòu)品牌，尺寸約為100 nm深入開展。核磁共振氫譜出現(xiàn)特征峰表明AC─PEG─NHS 修飾的 mCMVs的制備成功。通過(guò)將天然抗氧化劑安石榴苷負(fù)載到 mCMVs內(nèi)部制備PUN@mCMVs納米粒紮實做。TEM 圖像顯示 mCMVs的杯狀結(jié)構(gòu)被密封，藥物成功加載到 mCMV 內(nèi)部至關重要。通過(guò)免疫熒光染色在軟骨細(xì)胞表面觀察到與細(xì)胞整合作用相關(guān)的特定蛋白質(zhì)提供深度撮合服務，包括 CD44 、整合素 α 1的發生、整合素 β 1  和 E-鈣粘蛋白組成部分。且細(xì)胞可以攝取PUN@mCMVs，細(xì)胞膠囊制備成功新的動力。

圖2. PUN@mCMVs細(xì)胞膠囊的制備和表征的過程中。

其中 PUN8@SerMA-mCMVs 水凝膠的增殖促進(jìn)細(xì)胞增殖作用最高。且PUN8@SerMA-mCMV 組表現(xiàn)出更典型的軟骨腔隙結(jié)構(gòu)和更顯著的細(xì)胞外基質(zhì)分泌廣泛關註，蛋白多糖沉積增強(qiáng)促進進步，軟骨細(xì)胞分泌 COL II 增加。軟骨損傷部位的 ROS 過(guò)度積累經(jīng)常導(dǎo)致氧化應(yīng)激優勢領先，從而抑制細(xì)胞增殖迎來新的篇章，降解細(xì)胞外基質(zhì)，并破壞內(nèi)源性組織修復(fù)過(guò)程推動並實現。安石榴苷中的 17 個(gè)活性酚羥基充當(dāng)氫原子供體薄弱點，中和自由基并形成穩(wěn)定的非自由基物質(zhì)。這個(gè)過(guò)程終止了自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)優化程度，從而減緩或防止對(duì)細(xì)胞和組織的氧化損傷積極性。因此，PUN8@SerMA-mCMVs 的抗氧化活性可能支持細(xì)胞增殖和軟骨再生不斷豐富。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明實施體系，細(xì)胞膠囊水凝膠具有顯著的自由基清除活性，能夠有效清除細(xì)胞內(nèi)的多余活性氧各有優勢，顯著上調(diào)編碼抗氧化金屬酶的 SOD1 和 SOD2 和下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-3 和 MMP-13 的表達(dá)發揮，從而來(lái)保護(hù)軟骨細(xì)胞免受細(xì)胞炎癥引起的氧化應(yīng)激。PUN8@SerMA-mCMV 細(xì)胞膠囊水凝膠表現(xiàn)出的抑菌活性更加堅強，能夠明顯抑制大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的活性與時俱進，這可能有利于3D生物打印和組織工程的整個(gè)過(guò)程。

采用摩方精密nanoArch® S140（精度：10 μm）3D打印機(jī)測(cè)試細(xì)胞膠囊遞送生物墨水的打印能力初步建立，并將軟骨細(xì)胞負(fù)載到PUN8@SerMA-mCMV 生物墨水中綜合運用。實(shí)驗(yàn)表明，生物墨水打印的水凝膠產(chǎn)品表現(xiàn)出優(yōu)異的可打印性和形狀保真度的方法。生物3D打印后實事求是，封裝在打印水凝膠中的軟骨細(xì)胞表現(xiàn)出高細(xì)胞活力進行探討。這些結(jié)果表明，細(xì)胞膠囊遞送生物墨水 PUN8@SerMA-mCMVs適用于 3D 生物打印和組織工程應(yīng)用服務水平。

圖3. PUN@SerMA-mCMVs生物墨水的DLP生物打印最新。

PUN8@SerMA-mCMV 生物墨水在SD大鼠體內(nèi)促進(jìn)軟骨缺損修復(fù)。結(jié)果表明處理方法，與空白組相比重要作用，實(shí)驗(yàn)組新軟骨覆蓋原始缺損區(qū)域，并與周圍的正常軟骨組織高度融合習慣，具有最高的組織學(xué)評(píng)分充足，micro-CT表明新生軟骨已經(jīng)填充了缺損，修復(fù)區(qū)域的表面相對(duì)平坦的積極性。組織學(xué)染色實(shí)驗(yàn)表明綠色化發展，在 PUN8@SerMA-mCMVs 組中，軟骨細(xì)胞增殖并整齊排列不久前，表現(xiàn)出特征性的軟骨腔隙和層狀結(jié)構(gòu)用上了，具有最小的不全修復(fù)組織。此外能力建設，新生軟骨呈現(xiàn)清晰完整的潮線可靠保障，分泌了更多更均勻的細(xì)胞外基質(zhì)，上調(diào)COL II的表達(dá)和并降低 MMP-13的表達(dá)設計標準，表明該生物墨水具有有效修復(fù)軟骨缺損的能力開展。

圖4. 關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)的宏觀、組織學(xué)和免疫組織化學(xué)評(píng)估發揮重要帶動作用。

結(jié)論與展望：
在這項(xiàng)研究中開發(fā)了一種組成細(xì)胞膠囊遞送生物墨水的策略意向，通過(guò)該策略，將普通生物墨水材料（如 SerMA）和 mCMVs組合為加載一定量抗氧化試劑的細(xì)胞膠囊至關重要，從而產(chǎn)生生物墨水發展空間。與使用替代藥物負(fù)載方法的生物墨水相比，這種策略不僅延長(zhǎng)了藥物的半衰期有所應，還增強(qiáng)了生物墨水的生物相容性足了準備、可打印性和利用率。SD 大鼠軟骨缺損修復(fù)試驗(yàn)結(jié)果表明著力提升，與 SerMA 生物墨水和對(duì)照相比深刻內涵，PUN8@SerMA─mCMV 生物墨水的組織再生效率高∪诤?？紤]到 PUN8@SerMA-mCMV 生物墨水的抗氧化活性和抗菌能力深入闡釋，它在未來(lái)可能應(yīng)用于組織工程，特別是特定的病理微環(huán)境完成的事情，如在氧化應(yīng)激下物聯與互聯。